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酰基肉堿分析取得新進展_上海長肯試驗設備

更新時間:2018-06-20  |  點擊率:1439

 近日,中科院大連化學物理研究所許國旺研究員團隊在利用液相色譜-高分辨質譜聯(lián)用技術(LC-HRMS)分析酰基肉堿的研究中取得新進展,研究結果在Analytical Chemistry雜志發(fā)表。

  酰基肉堿是一類重要的代謝物,在許多生物過程中發(fā)揮重要作用,如脂肪酸的b-氧化代謝。由于不同長度的酰基鏈和同分異構體的存在,酰基肉堿的種類繁多。已有的大多分析方法中,可檢測到的酰基肉堿數(shù)常常幾十種。為了提高酰基肉堿的分析覆蓋度, 該課題組建立了一種能分析700余種酰基肉堿的液相色譜-質譜方法。

  首先,在全掃描/數(shù)據(jù)依賴的二級質譜數(shù)據(jù)采集模式(Full MS/ddMS2)下分析混合生物樣本,篩選出104個能產(chǎn)生酰基肉堿特征碎片的母離子。根據(jù)質量數(shù)和分子式,將上述酰基肉堿按元素組成進行大類歸屬。然后在各大類中計算每一個酰基肉堿理論質荷比,并用于在全掃描數(shù)據(jù)中的色譜峰提取,共發(fā)現(xiàn)298個酰基肉堿母離子,作為第二步靶向采集的基礎。進一步地,在全掃描結合平行反應監(jiān)測模式(Full MS +PRM)下, 在混合樣本中對298個母離子進行靶向二級分析,得到其高分辨二級質譜信息,結合質量數(shù)、特征碎片、一級和二級色譜-質譜譜圖確定酰基肉堿結構,共鑒定出733個酰基肉堿。

  在上述基礎上,在每個大類中根據(jù)結構-保留關系模型,進一步預測各同系物亞組中未檢測到的酰基肉堿。終,一個包含758種酰基肉堿的數(shù)據(jù)庫被建立,該數(shù)據(jù)庫是迄今為止大的酰基肉堿數(shù)據(jù)庫。應用建立的LC-MS方法和該數(shù)據(jù)庫,可分別從人的血漿,尿液和小鼠的肝臟中檢測出241, 515和222 種酰基肉堿。

  本研究提出的大規(guī)模定性策略有用于其他類代謝物定性的潛能,對改善代謝物分析的覆蓋度有極大的促進作用。該研究得到了國家自然科學基金項目和國家重點研究發(fā)展計劃的資助。

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